你是不是也曾在實(shí)驗(yàn)室里，面對(duì)那臺(tái)看起來“高冷又神秘”的PCR儀時(shí)，心里打鼓？別擔(dān)心，作為一名深耕生命科學(xué)領(lǐng)域5年的自媒體作者，我用真實(shí)案例告訴你：掌握它，其實(shí)沒那么難！
Q1：什么是PCR儀？它到底在干嘛？
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）儀就像DNA的“復(fù)印機(jī)”。它能將微量的DNA片段在短時(shí)間內(nèi)復(fù)制成百萬倍，方便我們檢測(cè)、分析甚至克隆基因。比如我在去年幫一位朋友做親子鑒定時(shí)，就是靠它從一根頭發(fā)里提取出足夠多的DNA，最終確認(rèn)了親緣關(guān)系。
Q2：第一次用PCR儀，要準(zhǔn)備什么？
新手別慌！你需要：樣本（血液、唾液、組織等）、引物（像DNA的“定位器”）、dNTPs（原料）、Taq DNA聚合酶（復(fù)印機(jī)的“墨水”），還有最重要的——預(yù)混好的PCR反應(yīng)體系！我第一次操作時(shí)，就因?yàn)橥浖覯g2?導(dǎo)致失敗，后來才知道它是酶活性的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。
Q3：設(shè)置程序真的復(fù)雜嗎？有模板嗎？
其實(shí)超簡(jiǎn)單！以常規(guī)擴(kuò)增為例，程序通常是：95°C變性30秒 → 58°C退火30秒 → 72°C延伸1分鐘，循環(huán)30次。我常用的是BioRad C1000 Touch PCR儀，界面友好，還能保存常用程序。有一次我給學(xué)生演示時(shí)，直接調(diào)出之前存好的“新冠核酸檢測(cè)程序”，他們都說：“原來這么絲滑！”
Q4：為什么我的結(jié)果總是陰性？是儀器的問題嗎？
先別急著怪儀器！我遇到過一個(gè)真實(shí)案例：一位研究生連續(xù)3天PCR失敗，最后發(fā)現(xiàn)是離心管污染了——原來是她用同一個(gè)移液槍頭取不同樣品，交叉污染了。所以記?。簾o菌操作+專用耗材=成功的一半！另外，記得每次運(yùn)行前都要檢查溫度是否校準(zhǔn)，很多問題其實(shí)是“小細(xì)節(jié)”惹的禍。
Q5：怎么判斷結(jié)果靠譜？
跑完電泳后，看條帶！清晰明亮、位置正確就是陽性。我曾用PCR擴(kuò)增植物抗蟲基因，結(jié)果出來時(shí)，看到目標(biāo)條帶比對(duì)照還亮，那一刻真的超級(jí)爽！建議配個(gè)凝膠成像系統(tǒng)，手機(jī)拍下也能發(fā)朋友圈，配上文字：“今天，我讓DNA開口說話了?”
總結(jié)一句：PCR儀不是魔法，而是工具；熟練不是天賦，是練習(xí)。下次你走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，不妨對(duì)自己說：“嘿，這臺(tái)機(jī)器，我熟！”
